DELLA פּראָטעאינען זענען קאָנסערווירטוואוקס רעגולאַטאָרןוואָס שפּילן אַ צענטראַלע ראָלע אין פלאַנצן אַנטוויקלונג אין ענטפער צו אינערלעכע און אויסערלעכע סיגנאַלן. ווי טראַנסקריפּשאַנאַל רעגולאַטאָרן, בינדן זיך DELLAs צו טראַנסקריפּציע פאַקטאָרן (TFs) און היסטאָן H2A דורך זייערע GRAS דאָמעינען און ווערן רעקרוטירט צו ווירקן אויף פּראָמאָטערס. לעצטע שטודיעס האָבן געוויזן אַז DELLA סטאַביליטעט איז רעגולירט נאָך-טראַנסלאַציאָנעל דורך צוויי מעכאַניזמען: פּאָליוביקיטינאַציע אינדוצירט דורך די פלאַנצן האָרמאָןגיבבערעלין, וואָס פירט צו זייער שנעלער דעגראַדאַציע, און קאָניוגאַציע מיט קליינעם יוביקוויטין-ווי מאָדיפיצירער (SUMO), וואָס פאַרגרעסערט זייער אַקומולאַציע. דערצו, DELLA טעטיקייט איז דינאַמיש רעגולירט דורך צוויי באַזונדערע גליקאָסילאַציע מעקאַניזמען: O-פוקאָסילאַציע פֿאַרשטאַרקט DELLA-TF ינטעראַקציע, בשעת O-פֿאַרבונדענע N-אַסעטילגלוקאָסאַמין (O-GlcNAc) מאָדיפיקאַציע ינכיבירט DELLA-TF ינטעראַקציע. אָבער, די ראָלע פון DELLA פאָספאָרילאַציע איז נישט קלאָר ווי פריערדיגע שטודיעס האָבן געוויזן קאָנפליקטירנדיקע רעזולטאַטן, מיט עטלעכע וואָס פֿאָרשלאָגן אַז פאָספאָרילאַציע פּראָמאָטירט אָדער ריפּרעסיז DELLA דעגראַדאַציע און אַנדערע וואָס פֿאָרשלאָגן אַז פאָספאָרילאַציע אַפעקץ נישט זייער פעסטקייט. דאָ, מיר ידענטיפיצירן פאָספאָרילאַציע זייטלעך אין די GA1-3 רעפּרעסער (RGA), AtDELLA, פּיוראַפייד פון Arabidopsis thaliana דורך מאַסע ספּעקטראָמעטריע און ווייַזן אַז פאָספאָרילאַציע פון צוויי RGA פּעפּטיידז אין די PolyS און PolyS/T מקומות פֿאַרשטאַרקט RGA טעטיקייט דורך פּראָמאָטירן H2A ביינדינג און RGA פֿאַרבינדונג מיט ציל פּראָמאָטערס. באַמערקענסווערט, פאָספאָרילאַציע האט נישט אַפעקטירט RGA-TF ינטעראַקשאַנז אָדער RGA פעסטקייט. אונדזער שטודיע אַנטפּלעקט אַ מאָלעקולאַרן מעכאַניזם דורך וועלכן פאָספאָרילאַציע אינדוצירט DELLA טעטיקייט.
אונדזער מאַסע ספּעקטראָמעטרישע אַנאַליז האָט אַנטפּלעקט אַז ביידע Pep1 און Pep2 זענען געווען העכסט פאָספאָרילירט אין RGA אין דעם GA-דעפיציענט Ga1 הינטערגרונט. אין דערצו צו דעם לערנען, האָבן פאָספאָפּראָטעאָמיק שטודיעס אויך אַנטפּלעקט Pep1 פאָספאָרילאַציע אין RGA, כאָטש זיין ראָלע איז נאָך נישט געלערנט געוואָרן53,54,55. אין קאַנטראַסט, Pep2 פאָספאָרילאַציע איז נישט פריער באַשריבן געוואָרן ווייל דעם פּעפּטיד קען נאָר דעטעקטירט ווערן מיטן RGAGKG טראַנסגענע. כאָטש די m1A מוטאַציע, וואָס האָט אָפּגעשאַפֿט Pep1 פאָספאָרילאַציע, האָט בלויז אַ ביסל רעדוצירט RGA אַקטיוויטעט אין planta, האָט עס געהאַט אַן אַדיטיווע ווירקונג ווען עס איז קאָמבינירט געוואָרן מיט m2A אין רעדוצירן RGA אַקטיוויטעט (Supplementary Figure 6). וויכטיק, Pep1 פאָספאָרילאַציע איז געווען באַדייטנד רעדוצירט אין דעם GA-ענהאַנסט sly1 מוטאַנט קאַמפּערד צו ga1, וואָס סאַגדזשעסט אַז GA פּראָמאָטירט RGA דעפאָספאָרילאַציע, רעדוצירנדיק זיין אַקטיוויטעט. דער מעכאַניזם דורך וועלכן GA סאַפּרעסט RGA פאָספאָרילאַציע דאַרף ווייטערדיקע אויספאָרשונג. איין מעגלעכקייט איז אַז דאָס ווערט דערגרייכט דורך דער רעגולאַציע פון אַן אומבאַקאַנט פּראָטעין קינאַזע. כאָטש שטודיעס האָבן געוויזן אַז די אויסדרוק פון די CK1 פּראָטעין קינאַזע EL1 איז דאַונרעגיאַלייטיד דורך GA אין רייז41, אונדזערע רעזולטאַטן ווייַזן אַז העכער-אָרדענונג מוטאַציעס פון די אַראַבידאָפּסיס EL1 האָמאָלאָג (AEL1-4) טאָן ניט רעדוצירן RGA פאָספאָריליישאַן. אין העסקעם מיט אונדזערע רעזולטאַטן, אַ לעצטע פאָספאָפּראָטעאָמיק לערנען ניצן אַראַבידאָפּסיס AEL אָוווערעקספּרעסינג שורות און אַ ael טריפּל מוטאַנט האט נישט ידענטיפיצירט קיין DELLA פּראָטעינס ווי סאַבסטראַטן פון די קינאַזעס56. ווען מיר האָבן צוגעגרייט דעם מאַנוסקריפּט, עס איז געווען געמאלדן אַז GSK3, די דזשין קאָדינג אַ GSK3/SHAGGY-ווי קינאַזע אין ווייץ (Triticum aestivum), קענען פאָספאָרילירן DELLA (Rht-B1b)57, כאָטש פאָספאָריליישאַן פון Rht-B1b דורך GSK3 איז נישט באשטעטיקט אין פּלאַנטאַ. אין וויטראָ ענזימאַטיק ריאַקשאַנז אין דער בייַזייַן פון GSK3 נאכגעגאנגען דורך מאַסע ספּעקטראָמעטרי אַנאַליסיס גילוי דרייַ פאָספאָריליישאַן זייטלעך ליגן צווישן די DELLA און GRAS דאָומיינז פון Rht-B1b (Supplementary Fig. 3). סערין צו אַלאַנין סאַבסטיטוציעס ביי אַלע דריי פאָספאָרילאַציע זייטלעך האָבן רעזולטירט אין אַ פאַרקלענערטער Rht-B1b טעטיקייט אין טראַנסגעניק ווייץ, וואָס איז קאָנסיסטענט מיט אונדזערע געפינסן אַז אַלאַנין סאַבסטיטוציעס אין Pep2 RGA האָבן פאַרקלענערט RGA טעטיקייט. אָבער, אין וויטראָ פּראָטעין דעגראַדאַציע פּרובירן האָבן ווייטער דעמאָנסטרירט אַז פאָספאָרילאַציע קען אויך סטאַביליזירן Rht-B1b57. דאָס איז אין קאַנטראַסט צו אונדזערע רעזולטאַטן וואָס ווייַזן אַז אַלאַנין סאַבסטיטוציעס אין Pep2 RGA טוישן נישט זיין פעסטקייט אין פּלאַנטאַ. GSK3 אין ווייץ איז אַן אָרטהאָלאָג פון בראַססינאָסטערויד-נישט-סענסיטיוו פּראָטעין 2 (BIN2) אין אַראַבידאָפּסיס 57. BIN2 איז אַ נעגאַטיווער רעגולאַטאָר פון BR סיגנאַלינג, און BR אַקטיוויזירט זיין סיגנאַלינג וועג דורך פאַראורזאַכן BIN2 דעגראַדאַציע 58. מיר האָבן געוויזן אַז BR באַהאַנדלונג פאַרקלענערט נישט RGA פעסטקייט 59 אָדער פאָספאָרילאַציע לעוועלס אין אַראַבידאָפּסיס (סאַפּלעמענטאַרי פיגור 2), וואָס סאַגדזשעסטיד אַז RGA איז נישט מסתּמא צו זיין פאָספאָרילירט דורך BIN2.
אלע קוואנטיטאטיווע דאטן זענען סטאטיסטיש אנאליזירט געווארן ניצנדיג עקסעל, און באדייטנדע אונטערשיידן זענען באשטימט געווארן ניצנדיג סטודענט'ס ט-טעסט. קיין סטאטיסטישע מעטאדן זענען נישט גענוצט געווארן צו באשטימען די גרייס פון די מוסטער. קיין דאטן זענען נישט אויסגעשלאסן געווארן פון דער אנאליז; דער עקספערימענט איז נישט ראנדאמיזירט געווארן; און די פארשער זענען געווען באוואוסטזיניק וועגן דער צוטיילונג בעת דעם עקספערימענט און רעזולטאט אפשאצונג. מוסטער גרייסן ווערן צוגעשטעלט אין די פיגור לעגענדס און אין די רויע דאטן טעקעס.
פּאָסט צייט: 15טן אַפּריל 2025