פאָספאָרילאַציע אַקטיוויזירט דעם הויפּט וווּקס רעגולאַטאָר DELLA אין אַראַבידאָפּסיס דורך פּראָמאָטירן די פֿאַרבינדונג פון היסטאָן H2A מיט כראָמאַטין.

DELLA פּראָטעאינען זענען קאָנסערווירטע מאַסטער פּראָטעאינען.וואוקס רעגולאַטאָרןוואָס שפּילן אַ צענטראַלע ראָלע אין קאָנטראָלירן פלאַנצן אַנטוויקלונג אין ענטפער צו אינערלעכע און סביבה קיוז. DELLA אַקט ווי אַ טראַנסקריפּשאַנאַל רעגולאַטאָר און ווערט רעקרוטירט צו ציל פּראָמאָטערס דורך בינדן צו טראַנסקריפּציע פאַקטאָרן (TFs) און היסטאָן H2A דורך זיין GRAS דאָומיין. לעצטע שטודיעס האָבן געוויזן אַז DELLA סטאַביליטעט איז פּאָסט-טראַנסלאַציאָנעל רעגולירט דורך צוויי מעכאַניזמען: פּאָליוביקוויטינאַציע ינדוסט דורך די פיטאָהאָרמאָן גיבבערעללין, וואָס פירט צו זיין שנעל דעגראַדאַציע, און קאָנדזשוגאַציע פון ​​קליינע יוביקוויטין-ווי מאָדיפיערס (SUMO) צו פאַרגרעסערן זיין אַקיומיאַליישאַן. אין דערצו, DELLA טעטיקייט איז דינאַמיש רעגולירט דורך צוויי פאַרשידענע גליקאָסילאַטיאָנס: די DELLA-TF ינטעראַקשאַן איז ענכאַנסט דורך O-פוקאָסילאַטיאָן אָבער ינכיבאַטיד דורך O-לינקד N-אַסעטילגלוקאָסאַמין (O-GlcNAc) מאָדיפיקאַטיאָן. אָבער, די ראָלע פון ​​DELLA פאָספאָרילאַטיאָן בלייבט נישט קלאָר, ווי פריערדיקע שטודיעס האָבן געוויזן קאָנפליקטירנדיק רעזולטאַטן, ריינדזשינג פון די וואָס ווייַזן אַז פאָספאָרילאַטיאָן פּראַמאָוט אָדער ראַדוסאַז DELLA דעגראַדאַציע צו אנדערע וואָס ווייַזן אַז פאָספאָרילאַטיאָן טוט נישט ווירקן זיין סטאַביליטעט. דאָ, מיר ידענטיפיצירן פאָספאָרילאַטיאָן זייטלעך אין REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) גערייניקט פון Arabidopsis thaliana דורך מאַסע ספּעקטראָמעטרי אַנאַליז און ווייַזן אַז פאָספאָרילאַציע פון ​​צוויי RGA פּעפּטיידן אין די PolyS און PolyS/T געביטן פּראָמאָטירט H2A ביינדינג און ענכאַנסט RGA טעטיקייט. פֿאַרבינדונג פון RGA מיט ציל פּראָמאָטערס. באַמערקענסווערט, פאָספאָרילאַציע אַפעקץ נישט RGA-TF ינטעראַקשאַנז אָדער RGA סטאַביליטעט. אונדזער שטודיע אַנטפּלעקט דעם מאָלעקולאַרן מעקאַניזאַם דורך וועלכן פאָספאָרילאַציע אינדוצירט DELLA טעטיקייט.
כדי צו דערקלערן די ראלע פון ​​פאספארילאציע אין רעגולירן DELLA פונקציע, איז קריטיש צו אידענטיפיצירן DELLA פאספארילאציע זייטלעך אין וויווא און דורכפירן פונקציאנעלע אנאליזן אין פלאנצן. דורך אפפיניטי רייניקונג פון פלאנצן עקסטראקטן נאכגעפאלגט דורך MS/MS אנאליז, האבן מיר אידענטיפיצירט עטלעכע פאספאסיטן אין RGA. אונטער באדינגונגען פון GA דיפישענסי, פארגרעסערט זיך RHA פאספארילאציע, אבער פאספארילאציע ווירקט נישט אויף איר סטאביליטעט. וויכטיג, קא-IP און ChIP-qPCR אסייז האבן געוויזן אז פאספארילאציע אין דער PolyS/T ראיאן פון RGA פראמאטירט איר אינטעראקציע מיט H2A און איר פארבינדונג מיט ציל פראמאטערס, וואס האט אנטפלעקט דעם מעכאניזם דורך וועלכן פאספארילאציע אינדוצירט RGA פונקציע.
RGA ווערט רעקרוטירט צו ציל כראָמאַטין דורך די אינטעראַקציע פון ​​די LHR1 סובדאָמעין מיט TF און דאַן בינדט זיך צו H2A דורך זיין PolyS/T ראיאן און PFYRE סובדאָמעין, פאָרמענדיק דעם H2A-RGA-TF קאָמפּלעקס צו סטאַביליזירן RGA. פאָספאָרילאַציע פון ​​Pep 2 אין די PolyS/T ראיאן צווישן די DELLA דאָמעין און די GRAS דאָמעין דורך אַן אומידענטיפיצירטער קינאַזע פֿאַרשטאַרקט RGA-H2A בינדונג. די rgam2A מוטאַנט פּראָטעין אַפשאַפן RGA פאָספאָרילאַציע און אַדאַפּטירט אַן אַנדער פּראָטעין קאָנפאָרמאַציע צו אַריינמישן זיך מיט H2A בינדונג. דאָס רעזולטאַטן אין דעסטאַביליזאַציע פון ​​טראַנזיענט TF-rgam2A אינטעראַקציעס און דיסאָסיאַציע פון ​​rgam2A פון ציל כראָמאַטין. די פיגור דיפּיקט בלויז RGA-מעדיאַטעד טראַנסקריפּשאַנאַל רעפּרעסיע. א ענלעכער מוסטער קען ווערן באַשריבן פֿאַר RGA-מעדיאַטעד טראַנסקריפּשאַנאַל אַקטיוואַציע, אַחוץ אַז די H2A-RGA-TF קאָמפּלעקס וואָלט העכערן ציל גענע טראַנסקריפּציע און דעפאָספאָרילאַציע פון ​​rgam2A וואָלט פֿאַרמינערן טראַנסקריפּציע. פיגור מאָדיפיצירט פון Huang et al.21.
אלע קוואנטיטאטיווע דאטן זענען סטאטיסטיש אנאליזירט געווארן ניצנדיג עקסעל, און באדייטנדע אונטערשיידן זענען באשטימט געווארן ניצנדיג סטודענט'ס ט טעסט. קיין סטאטיסטישע מעטאדן זענען נישט גענוצט געווארן צו פאראויס באשטימען די מוסטער גרייס. קיין דאטן זענען נישט אויסגעשלאסן געווארן פון דער אנאליז; דער עקספערימענט איז נישט ראנדאמיזירט געווארן; די פארשער זענען נישט געווען בלינד צו דער פארשפרייטונג פון דאטן בעת ​​דעם עקספערימענט און די עוואלואציע פון ​​די רעזולטאטן. די מוסטער גרייס איז אנגעצייכנט אין דער פיגור לעגענדע און מקור דאטן טעקע.
פֿאַר מער אינפֿאָרמאַציע וועגן דעם שטודיע־פּלאַן, זעט דעם אַבסטראַקט פֿון דער נאַטירלעכער פּאָרטפֿאָליאָ־באַריכט פֿאַרבונדן מיט דעם אַרטיקל.
מאַסע ספּעקטראָמעטרי פּראָטעאָמיקס דאַטן זענען בייגעשטייערט געוואָרן צום ProteomeXchange קאָנסאָרטיום דורך דעם PRIDE66 פּאַרטנער רעפּאָזיטאָרי מיטן דאַטאַסעט אידענטיפיצירער PXD046004. אַלע אַנדערע דאַטן באַקומען בעת ​​דעם לערנען ווערן פּרעזענטירט אין די סאַפּלעמענטאַרי אינפֿאָרמאַציע, סאַפּלעמענטאַרי דאַטן טעקעס, און רויע דאַטן טעקעס. קוואַל דאַטן זענען צוגעשטעלט פֿאַר דעם אַרטיקל.