מאָרטאַליטעט און טאַקסיסיטי פון קאמערציעלע סיפּערמעטהרין פּרעפּעריישאַנז צו קליינע וואַסער קאַפּיטל

די שטודיע האט אפגעשאצט די טויטלעכקייט, סוב-טויטלעכקייט, און טאקסיקיטעט פון קאמערציעלעסיפּערמעטהריןפאָרמולאַציעס צו אַנוראַן קאַפּעלעך. אין דעם אַקוטן טעסט, קאָנצענטראַציעס פון 100–800 μg/L זענען טעסטעד געוואָרן פֿאַר 96 שעה. אין דעם כראָנישן טעסט, נאַטירלעך פאָרקומענדיקע סיפּערמעטהרין קאָנצענטראַציעס (1, 3, 6, און 20 μg/L) זענען טעסטעד געוואָרן פֿאַר מאָרטאַליטעט, נאכגעגאנגען דורך מיקראָנוקלעוס טעסטינג און רויטע בלוט צעל נוקלעאַר אַבנאָרמאַליטעטן פֿאַר 7 טעג. די LC50 פון דער קאמערציעלער סיפּערמעטהרין פאָרמולאַציע צו קאַפּעלעך איז געווען 273.41 μg L−1. אין דעם כראָנישן טעסט, די העכסטע קאָנצענטראַציע (20 μg L−1) האט רעזולטירט אין מער ווי 50% מאָרטאַליטעט, ווייל עס האט געהרגעט העלפט פון די קאַפּעלעך וואָס זענען געטעסט געוואָרן. דער מיקראָנוקלעוס טעסט האט געוויזן באַדייטנדיקע רעזולטאַטן ביי 6 און 20 μg L−1 און עטלעכע נוקלעאַר אַבנאָרמאַליטעטן זענען דעטעקטעד געוואָרן, וואָס ווייַזט אַז די קאמערציעלע סיפּערמעטהרין פאָרמולאַציע האט גענאָטאָקסיק פּאָטענציעל קעגן P. gracilis. סיפּערמעטהרין איז אַ הויך ריזיקירן פֿאַר דעם מינים, וואָס ווייַזט אַז עס קען פאַרשאַפן קייפל פּראָבלעמען און ווירקן די דינאַמיק פון דעם עקאָסיסטעם אין די קורץ און לאַנג טערמין. דעריבער, קען מען אויספירן אז קאמערציעלע ציפּערמעטהרין פאָרמולאַציעס האָבן טאָקסישע ווירקונגען אויף פּ. גראַסיליס.
צוליב דער קאנטינעווער אויסברייטערונג פון לאַנדווירטשאַפטלעכע אַקטיוויטעטן און אינטענסיווער אָנווענדונג פוןפּעסט קאָנטראָלמיטלען, וואַסער חיות זענען אָפט אויסגעשטעלט צו פּעסטאַסיידז1,2. פאַרפּעסטיקונג פון וואַסער רעסורסן לעבן לאַנדווירטשאַפטלעכע פעלדער קען ווירקן די אַנטוויקלונג און איבערלעבונג פון ניט-ציל אָרגאַניזמען אַזאַ ווי אַמפיביאַנז.
אַמפֿיביעס ווערן אַלץ וויכטיקער אין דער אַסעסמענט פֿון סביבה־מאַטריצן. אַנוראַנס ווערן באַטראַכט ווי גוטע ביאָאינדיקאַטאָרן פֿון סביבה־פֿאַרפּעסטיקונגען צוליב זייערע אייגנאַרטיקע כאַראַקטעריסטיקס ווי קאָמפּלעקסע לעבן־ציקלען, שנעלע לאַרוואַלע וואוקס־ראַטעס, טראָפֿישע סטאַטוס, דורכדרינגלעכע הויט10,11, אָפּהענגיקייט פֿון וואַסער פֿאַר רעפּראָדוקציע12 און נישט־געשיצטע אייער11,13,14. דער קליינער וואַסער־פֿראָש (Physalaemus gracilis), באַקאַנט ווי דער וויינענדיקער פֿראָש, איז געוויזן געוואָרן צו זיין אַ ביאָאינדיקאַטאָר־מינים פֿון פּעסטאַציד־פֿאַרפּעסטיקונג4,5,6,7,15. דער מינים געפֿינט זיך אין שטייענדיקע וואַסערן, באַשיצטע געביטן אָדער געביטן מיט פֿאַרשידענע לעבנס־שטחים אין אַרגענטינע, אורוגוויי, פּאַראַגוויי און Brazil1617 און ווערט באַטראַכט ווי סטאַביל לויט דער IUCN קלאַסיפֿיקאַציע צוליב זיין ברייטער פֿאַרשפּרייטונג און טאָלעראַנץ פֿון פֿאַרשידענע לעבנס־שטחים18.
סובלעטאלע עפעקטן זענען געמאלדן געווארן אין אמפיביעס נאך ​​אויסשטעלן צו סיפערמעטהרין, אריינגערעכנט פארהאלטונגס-, מארפאָלאָגישע און בייאָכעמישע ענדערונגען אין קאפקייקלעך23,24,25, געענדערטע שטאַרבליכקייט און מעטאַמאָרפאָז צייט, ענזימאַטישע ענדערונגען, פארמינערטע כאַטשינג הצלחה24,25, היפּעראַקטיוויטי26, אינהיביציע פון ​​כאָלינעסטעראַזע טעטיקייט27 און ענדערונגען אין שווימען פאָרשטעלונג7,28. אָבער, שטודיעס פון די גענאָטאָקסיק עפעקטן פון סיפערמעטהרין אין אמפיביעס זענען לימיטעד. דעריבער, איז עס וויכטיק צו אַססעסס די סאַסעפּטאַבילאַטי פון אַנוראַן מינים צו סיפערמעטהרין.
סביבה־פאַרפּעסטיקונג אַפעקטירט דעם נאָרמאַלן וואוקס און אַנטוויקלונג פון אַמפיביעס, אָבער די ערנסטסטע נעגאַטיווע ווירקונג איז גענעטישע שאָדן צו דנאַ געפֿירט דורך פּעסטאַציד ויסשטעלן13. בלוט צעל מאָרפאָלאָגיע אַנאַליסיס איז אַ וויכטיק ביאָאינדיקאַטאָר פון פאַרפּעסטיקונג און פּאָטענציעל טאַקסיסיטי פון אַ סאַבסטאַנס צו ווילדע מינים29. דער מיקראָנוקלעוס טעסט איז איינער פון די מערסט אָפט געניצטע מעטהאָדס פֿאַר באַשטימען די גענאָטאָקסיסיטי פון כעמיקאַלן אין דער סביבה30. עס איז אַ שנעל, עפעקטיוו און ביליק מעטאָד וואָס איז אַ גוטער אינדיקאַטאָר פון כעמישער פאַרפּעסטיקונג פון אָרגאַניזמען אַזאַ ווי אַמפיביעס31,32 און קען צושטעלן אינפֿאָרמאַציע וועגן ויסשטעלן צו גענאָטאָקסיק פאַרפּעסטיקונגען33.
די ציל פון דעם שטודיע איז געווען צו אפשאצן דעם טאקסישן פאטענציאל פון קאמערציעלע ציפערמעטהרין פארמולאציעס צו קליינע וואסער קאטעקאלן ניצן א מיקראנוקלעוס טעסט און עקאלאגישע ריזיקע אפשאצונג.
קומולאַטיווע מאָרטאַליטעט (%) פון פּ. גראַצילאַס קאָפּפֿאַלן אויסגעשטעלט צו פֿאַרשידענע קאָנצענטראַציעס פֿון קאמערציעלן ציפּערמעטהרין בעת ​​דער אַקוטער פּעריאָדע פֿון דער טעסט.
קומולאַטיווע מאָרטאַליטעט (%) פון פּ. גראַצילאַס קאָפּפֿאַלן אויסגעשטעלט צו פֿאַרשידענע קאָנצענטראַציעס פֿון קאמערציעלן ציפּערמעטהרין בעת ​​אַ כראָנישער טעסט.
די באמערקטע הויכע שטאַרבליכקייט איז געווען אַ רעזולטאַט פון גענאָטאָקסישע עפֿעקטן אין אַמפֿיביעס אויסגעשטעלט צו פֿאַרשידענע קאָנצענטראַציעס פֿון סיפּערמעטהרין (6 און 20 μg/L), ווי באַוויזן דורך דער בייַזייַן פֿון מיקראָנוקלעי (MN) און נוקלעאַרע אַבנאָרמאַליטעטן אין עריטראָסיטן. פֿאָרמאַציע פֿון MN ווייזט אויף ערראָרס אין מיטאָזיס און איז פֿאַרבונדן מיט שלעכטע ביינדינג פֿון כראָמאָסאָמען צו מיקראָטובולעס, חסרונות אין פּראָטעין קאָמפּלעקסן פֿאַראַנטוואָרטלעך פֿאַר כראָמאָסאָם אויפֿנעמען און טראַנספּאָרט, ערראָרס אין כראָמאָסאָם סעגרעגאַציע און ערראָרס אין דנאַ שאָדן ריפּער38,39 און קען זיין פֿאַרבונדן מיט פּעסטאַסייד-ינדוסט אָקסידאַטיוו דרוק40,41. אַנדערע אַבנאָרמאַליטעטן זענען באמערקט געוואָרן ביי אַלע קאָנצענטראַציעס עוואַלויִרט. פֿאַרגרעסערטע סיפּערמעטהרין קאָנצענטראַציעס האָבן פֿאַרגרעסערט נוקלעאַרע אַבנאָרמאַליטעטן אין עריטראָסיטן מיט 5% און 20% ביי די לאָואַסט (1 μg/L) און העכסטן (20 μg/L) דאָסעס, ריספּעקטיוולי. למשל, ענדערונגען אין די דנאַ פֿון אַ מינים קענען האָבן ערנסטע קאַנסאַקווענצן פֿאַר ביידע קורץ- און לאַנג-טערמין ניצל, ריזאַלטינג אין פּאָפּולאַציע אַראָפּגאַנג, געביטן רעפּראָדוקטיווע טויגיקייט, ינברידינג, אָנווער פֿון גענעטישער דייווערסיטי, און געביטן מיגראַציע ראַטעס. אַלע די פֿאַקטאָרן קענען השפּעה האָבן אויף מינים ניצל און וישאַלט42,43. די פאָרמירונג פון עריטהראָיד אַבנאָרמאַליטעטן קען אָנווייַזן אַ בלאָק אין ציטאָקינעסיס, וואָס רעזולטירט אין אַבנאָרמאַל צעל טיילונג (בינוקלעאַטעד עריטהראָסיטעס)44,45; מולטילאָבעד קערנס זענען פּראָטרושאַנז פון די נוקלעאַר מעמבראַנע מיט קייפל לאָבעס46, בשעת אנדערע עריטהראָיד אַבנאָרמאַליטעטן קענען זיין פארבונדן מיט דנאַ אַמפּליפיקאַציע, אַזאַ ווי נוקלעאַר נירן/בלעבס47. די בייַזייַן פון אַנוקלעאַטעד עריטהראָסיטעס קען אָנווייַזן ימפּערד זויערשטאָף טראַנספּאָרט, ספּעציעל אין קאַנטאַמאַנייטאַד וואַסער48,49. אַפּאָפּטאָסיס ינדיקייץ צעל טויט50.
אַנדערע שטודיעס האָבן אויך דעמאָנסטרירט די גענאָטאָקסישע ווירקונגען פון סיפּערמעטהרין. קאַבאַניאַ עט אַל.51 האָבן דעמאָנסטרירט די בייַזייַן פון מיקראָנוקלעי און נוקלעאַרע ענדערונגען ווי בינוקלעאַטעד צעלן און אַפּאָפּטאָטיק צעלן אין אָדאָנטאָפרינוס אַמעריקאַנוס צעלן נאָך ויסשטעלן צו הויך קאַנסאַנטריישאַנז פון סיפּערמעטהרין (5000 און 10,000 μg L−1) פֿאַר 96 שעה. סיפּערמעטהרין-ינדוסט אַפּאָפּטאָסיס איז אויך דיטעקטעד אין פּ. ביליגאָניגערוס52 און רינעלאַ אַרענאַרום53. די רעזולטאַטן פֿאָרשלאָגן אַז סיפּערמעטהרין האט גענאָטאָקסישע ווירקונגען אויף אַ קייט פון וואַסער אָרגאַניזמען און אַז די MN און ENA אַסיי קען זיין אַן אינדיקאַטאָר פון סובלעטהאַל ווירקונגען אויף אַמפיביאַנס און קען זיין אַפּליקאַבאַל צו היגע מינים און ווילדע פּאָפּולאַציעס יקספּאָוזד צו טאַקסיקאַנץ12.
קאמערציעלע פאָרמולאַציעס פון סיפּערמעטהרין שטעלן פאר א הויכע סביבה-געפאַר (סיי אַקוטע און סיי כראָניש), מיט HQs וואָס איבערשטייגן די יו. עס. סביבה-פּראָטעקשאַן איידזשענסי (EPA) לעוועל54, וואָס קען נעגאַטיוו אַפעקטירן די מינים אויב זיי זענען פאַראַן אין דער סביבה. אין דער כראָנישער ריזיקאָ אַסעסמענט, איז די NOEC פאר שטאַרבליכקייט געווען 3 μg L−1, באַשטעטיקנדיק אַז די קאָנצענטראַציעס געפֿונען אין וואַסער קענען שטעלן א ריזיקאָ פאר די מינים55. די טויטלעכע NOEC פאר R. arenarum לאַרוואַ אויסגעשטעלט צו א געמיש פון ענדאָסולפאַן און סיפּערמעטהרין איז געווען 500 μg L−1 נאָך 168 שעה; דער ווערט איז געפאלן צו 0.0005 μg L−1 נאָך 336 שעה. די מחברים ווייַזן אַז ווי לענגער די אויסשטעלונג, אַלץ נידעריקער די קאָנצענטראַציעס וואָס זענען שעדלעך פאר די מינים. עס איז אויך וויכטיק צו אונטערשטרייַכן אַז די NOEC ווערטן זענען געווען העכער ווי די פון P. gracilis אין דער זעלבער אויסשטעלונג צייט, וואָס ווייַזט אַז די מינים רעאַקציע צו סיפּערמעטהרין איז מינים-ספּעציפיש. דערצו, אין טערמינען פון שטאַרבלעכקייט, האט דער CHQ ווערט פון P. gracilis נאך אויסשטעלונג צו ציפּערמעטהרין דערגרייכט 64.67, וואס איז העכער ווי דער רעפערענץ ווערט באַשטימט דורך די יו. עס. ענווייראָנמענטאַל פּראָטעקשאַן איידזשענסי54, און דער CHQ ווערט פון R. arenarum לאַרוואַ איז אויך געווען העכער ווי דעם ווערט (CHQ > 388.00 נאך 336 שעה), וואָס ווײַזט אָן אַז די שטודירטע אינסעקטיצידן שטעלן פאר א הויכן ריזיקע פאר עטלעכע אַמפיביע מינים. באַטראַכטנדיק אַז P. gracilis דאַרף בערך 30 טעג צו פאַרענדיקן מעטאַמאָרפאָזיס56, קען מען אויספירן אַז די שטודירטע קאָנצענטראַציעס פון ציפּערמעטהרין קענען ביישטייערן צו באַפעלקערונג אַראָפּגאַנג דורך פאַרהיטן ינפעקטעד יחידים פון אַרייַנטרעטן אין די דערוואַקסן אָדער רעפּראָדוקטיווע בינע אין אַ יונג עלטער.
אין דער אויסגערעכנטער ריזיקאָ אַסעסמענט פון מיקראָנוקלעי און אַנדערע עריטראָציט נוקלעאַרע אַבנאָרמאַליטעטן, די CHQ ווערטן זענען געווען פון 14.92 צו 97.00, וואָס ווייַזט אַז סיפּערמעטהרין האט אַ פּאָטענציעל גענאָטאָקסיק ריזיקאָ צו פּ. גראַציליס אפילו אין זיין נאַטירלעך וווין. נעמענדיג אין באַטראַכט מאָרטאַליטי, די מאַקסימום קאַנסאַנטריישאַן פון קסענאָביאָטיק קאַמפּאַונדז טאָלעראַבאַל צו פּ. גראַציליס איז געווען 4.24 μg L−1. אָבער, קאַנסאַנטריישאַנז אַזוי נידעריק ווי 1 μg/L אויך געוויזן גענאָטאָקסיק יפעקס. דעם פאַקט קען פירן צו אַ פאַרגרעסערונג אין דער נומער פון אַבנאָרמאַל יחידים57 און ווירקן די אַנטוויקלונג און רעפּראָדוקציע פון ​​מינים אין זייער וווין, לידינג צו אַ אַראָפּגאַנג אין אַמפיביאַן פּאָפּולאַציעס.
קאמערציעלע פאָרמולאַציעס פון דעם אינסעקטיציד סיפּערמעטהרין האָבן געוויזן הויכע אַקוטע און כראָנישע טאַקסיסיטי צו פּ. גראַסיליס. העכערע מאָרטאַליטי ראַטעס זענען באמערקט געוואָרן, מסתּמא צוליב טאַקסישע ווירקונגען, ווי באַוויזן דורך דער אנוועזנהייט פון מיקראָנוקלעי און עריטראָציט נוקלעאַרע אַבנאָרמאַליטעטן, ספּעציעל סערייטיד נוקלעי, לאָבעד נוקלעי, און וועסיקולאַר נוקלעי. אין דערצו, די שטודירט מינים האָבן געוויזן געוואקסן ענווייראָנמענטאַל ריסקס, ביידע אַקוטע און כראָניש. די דאַטן, קאַמביינד מיט פריערדיקע שטודיעס דורך אונדזער פאָרשונג גרופּע, האָבן געוויזן אַז אפילו פאַרשידענע קאמערציעלע פאָרמולאַציעס פון סיפּערמעטהרין נאָך געפֿירט צו פאַרקלענערט אַסעטילטשאָלינעסטעראַסע (AChE) און בוטירילטשאָלינעסטעראַסע (BChE) אַקטיוויטעטן און אָקסידאַטיוו דרוק58, און ריזאַלטיד אין ענדערונגען אין שווימען טעטיקייט און מויל מאַלפאָרמיישאַנז59 אין פּ. גראַסיליס, וואָס ינדיקייץ אַז קאמערציעלע פאָרמולאַציעס פון סיפּערמעטהרין האָבן הויכע לעטאַל און סובלעטאַל טאַקסיסיטי צו דעם מינים. האַרטמאַן עט על. 60 האָבן געפֿונען אַז קאמערציעלע פאָרמולאַציעס פון סיפּערמעטהרין זענען די מערסט טאַקסיק צו פּ. גראַסיליס און אן אנדער מינים פון דער זעלביקער מין (פּ. קיוויערי) קאַמפּערד מיט נייַן אנדערע פּעסטאַסיידז. דאָס סאַגדזשעסטירט אַז לעגאַל באַשטעטיקטע קאָנצענטראַציעס פון סיפּערמעטהרין פֿאַר ענווייראָנמענטאַל שוץ קענען רעזולטירן אין הויך מאָרטאַליטי און לאַנג-טערמין באַפעלקערונג אַראָפּגאַנג.
ווייטערדיגע שטודיעס זענען נויטיק צו אפשאצן די טאַקסיסיטי פון דעם פּעסטאַציד צו אַמפיביאַנס, ווײַל די קאָנצענטראַציעס געפֿונען אין דער סביבה קענען פאַראורזאַכן הויך מאָרטאַליטי און שטעלן אַ פּאָטענציעל ריזיקירן צו פּ. גראַצילאַס. פאָרשונג אויף אַמפיביאַן מינים זאָל זיין געמוטיקט, ווײַל דאַטן אויף די אָרגאַניזמען זענען זעלטן, ספּעציעל אויף בראַזיליאַנישע מינים.
דער כראָנישער טאַקסיסיטי טעסט האָט געדויערט 168 שעה (7 טעג) אונטער סטאַטישע באַדינגונגען און די סובלעטאַלע קאָנצענטראַציעס זענען געווען: 1, 3, 6 און 20 μg ai L−1. אין ביידע עקספּערימענטן, זענען 10 קאַפּעלעך פּער באַהאַנדלונג גרופּע עוואַלויִרט געוואָרן מיט זעקס רעפּליקאַטן, פֿאַר אַ גאַנץ פון 60 קאַפּעלעך פּער קאָנצענטראַציע. דערווייל, האָט די וואַסער-בלויז באַהאַנדלונג געדינט ווי אַ נעגאַטיווע קאָנטראָל. יעדער עקספּערימענטאַלער סעטאַפּ האָט באַשטאַנען פון אַ סטערילער גלאָז שיסל מיט אַ קאַפּאַציטעט פון 500 מל און אַ געדיכטקייט פון 1 קאַפּעלעך פּער 50 מל לייזונג. די פלאַש איז באדעקט געוואָרן מיט פּאָליעטילען פילם צו פאַרמייַדן פארדאַמפּונג און איז קאַנטיניואַסלי אַערירט געוואָרן.
דאס וואסער איז כעמיש אנאליזירט געווארן צו באשטימען פעסטיציד קאנצענטראציעס ביי 0, 96, און 168 שעה. לויט סאַבין און אנדערע 68 און מאַרטינס און אנדערע 69, זענען די אנאליזן דורכגעפירט געווארן אין דער פעסטיציד אנאליז לאבאראטאריע (LARP) פון דער פעדעראלער אוניווערסיטעט פון סאַנטאַ מאַריאַ ניצנדיק גאז כראָמאַטאָגראַפֿיע פארבונדן מיט טריפּל קוואַדרופּאָל מאַסע ספּעקטראָמעטריע (וואַריאַן מאָדעל 1200, פּאַלאָ אַלטאָ, קאַליפאָרניע, USA). די קוואַנטיטאַטיווע באַשטימונג פון פעסטיצידן אין וואַסער ווערט געוויזן ווי צוגאב מאַטעריאַל (טאַבעלע SM1).
פארן מיקראָנוקלעוס טעסט (MNT) און רויטע צעל נוקלעאַרע אַבנאָרמאַליטעט טעסט (RNA), זענען 15 קאַפּעלעך פון יעדער באַהאַנדלונג גרופּע אַנאַליזירט געוואָרן. קאַפּעלעך זענען אַנעסטעזירט געוואָרן מיט 5% לידאָקאַין (50 מג g-170) און בלוט מוסטערן זענען געזאַמלט געוואָרן דורך קאַרדיאַק פּאַנגקטשער מיט דיספּאָוזאַבאַל העפּאַריניזירטע שפּריץ. בלוט אויסשמירן זענען צוגעגרייט געוואָרן אויף סטערילע מיקראָסקאָפּ סליידז, לופט געטריקנט, פיקסירט מיט 100% מעטאַנאָל (4 °C) פֿאַר 2 מינוט, און דערנאָך געפֿאַרבט מיט 10% גיעמסאַ לייזונג פֿאַר 15 מינוט אין דער פינצטערניש. אין סוף פון דעם פּראָצעס, זענען די סליידז געוואַשן געוואָרן מיט דיסטילירט וואַסער צו באַזייַטיקן וידעפדיק פלעק און געטריקנט ביי צימער טעמפּעראַטור.
לפּחות 1000 רויטע בלוטקעלער (RBC) פון יעדן קאַפּעקל זענען אַנאַליזירט געוואָרן מיט אַ 100× מיקראָסקאָפּ מיט אַ 71 אָביעקטיוו צו באַשטימען די בייַזייַן פון MN און ENA. אַ סך הכל פון 75,796 רויטע בלוטקעלער פון קאַפּעקל זענען עוואַלויִרט געוואָרן באַטראַכטנדיק סיפּערמעטהרין קאָנצענטראַציעס און קאָנטראָלן. גענאָטאָקסיסיטי איז אַנאַליזירט געוואָרן לויט דער מעטאָדע פון ​​קאַראַסקאָ עט על. און פענעך עט על.38,72 דורך באַשטימען די אָפטקייט פון די פאלגענדע נוקלעאַרע לעזשאַנז: (1) אַנוקלעאַטע צעלן: צעלן אָן קערנס; (2) אַפּאָפּטאָטישע צעלן: נוקלעאַרע פראַגמענטאַציע, פּראָגראַמירטער צעל טויט; (3) בינוקלעאַטע צעלן: צעלן מיט צוויי קערנס; (4) נוקלעאַרע קנעפּלעך אָדער בלאָב צעלן: צעלן מיט קערנס מיט קליינע פּראָטרושאַנז פון דער נוקלעאַר מעמבראַנע, בלאָבס ענלעך אין גרייס צו מיקראָנוקלעי; (5) קאַריאָליזירטע צעלן: צעלן מיט בלויז די קאָנטור פון דעם קערן אָן אינערלעכן מאַטעריאַל; (6) קאַרבעד צעלן: צעלן מיט קערנס מיט קלאָרע ריסן אָדער נאָטשיז אין זייער פאָרעם, אויך גערופן ניר-פאָרמיגע קערנס; (7) לאָבולירטע צעלן: צעלן מיט קערן פּראָטרושאַנז גרעסער ווי די אויבן דערמאָנטע וועסיקלעס; און (8) מיקראָסעלן: צעלן מיט קאָנדענסירטע קערנס און רידוסט ציטאָפּלאַזמע. די ענדערונגען זענען קאַמפּערד מיט די נעגאַטיווע קאָנטראָל רעזולטאַטן.
די רעזולטאַטן פון די אַקוטע טאַקסיסיטי טעסט (LC50) זענען אַנאַליזירט געוואָרן מיט GBasic ווייכווארג און די TSK-Trimmed Spearman-Karber מעטאָדע74. די כראָנישע טעסט דאַטן זענען פאַר-טעסטעד געוואָרן פֿאַר טעות נאָרמאַליטי (Shapiro-Wilks) און כאָומאַדזשעניטי פון וואַריאַנס (Bartlett). די רעזולטאַטן זענען אַנאַליזירט געוואָרן מיט איין-וועג אַנאַליז פון וואַריאַנס (ANOVA). טוקי'ס טעסט איז געניצט געוואָרן צו פאַרגלייַכן דאַטן צווישן זיך, און דאַנעט'ס טעסט איז געניצט געוואָרן צו פאַרגלייַכן דאַטן צווישן דער באַהאַנדלונג גרופּע און דער נעגאַטיווער קאָנטראָל גרופּע.
LOEC און NOEC דאַטן זענען אַנאַליזירט געוואָרן מיט דאַנעט'ס טעסט. סטאַטיסטישע טעסץ זענען דורכגעפירט געוואָרן מיט Statistica 8.0 ווייכווארג (StatSoft) מיט אַ באַדייַטיקייט מדרגה פון 95% (p < 0.05).