פלאַנצן און פּאַטאָגענע מאַטעריאַלן
א סאָרגהום אַסאָציאַציע מאַפּינג פּאָפּולאַציע באַקאַנט ווי די סאָרגהום קאָנווערזשאַן פּאָפּולאַציע (SCP) איז געווען צוגעשטעלט דורך ד"ר פּאַט בראַון ביי דער אוניווערסיטעט פון אילינאָי (איצט ביי UC דייוויס). עס איז שוין פריער באַשריבן געוואָרן און איז אַ זאַמלונג פון פֿאַרשיידענע ליניעס קאָנווערטירט צו פאָטאָפּעריאָד-אינסענסיטיוויטי און קלענערער סטאַטור צו פֿאַרלייכטערן דעם וווּקס און אַנטוויקלונג פון די געוויקסן אין יו. עס. סביבות. 510 ליניעס פון דער פּאָפּולאַציע זענען געניצט געוואָרן אין דער שטודיע, כאָטש צוליב שלעכטער דזשערמאַניישאַן און אַנדערע קוואַליטעט קאָנטראָל פּראָבלעמען, זענען נישט אַלע ליניעס געניצט געוואָרן אין דער אַנאַליז פון אַלע דריי טרייץ. לעצטנס זענען דאַטן פון 345 ליניעס געניצט געוואָרן פֿאַר דער אַנאַליז פון דער כיטין רעאַקציע, 472 ליניעס פֿאַר דער flg22 רעאַקציע, און 456 פֿאַר TLS קעגנשטעל.ב. קוקישטאַם LSLP18 איז באַקומען געוואָרן פֿון ד"ר בערט בלום בײַ דער אוניווערסיטעט פֿון אַרקאַנסאָ.
MAMP ענטפער מעסטונג
צוויי פֿאַרשידענע MAMPs זענען גענוצט געוואָרן אין דער דאָזיקער שטודיע flg22, (Genscript קאַטאַלאָג נומער RP19986), און כיטין. סאָרגהום פלאַנצן זענען געוואַקסן אין ינסערץ געלייגט אויף פלאַכן אָנגעפילט מיט ערד (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) אין די גרינכאַוס. פלאַנצן זענען באַוואַסערט געוואָרן דעם טאָג איידער די מוסטער זאַמלונג צו ויסמיידן עקסטרע בלאַט נעץ דעם טאָג פון זאַמלונג.
די ליניעס זענען ראַנדאָמיזירט געוואָרן און, צוליב לאָגיסטישע סיבות, זענען זיי געפלאַנצט געוואָרן אין באַטשעס פון 60 ליניעס. פֿאַר יעדער ליניע זענען דריי "טעפּלעך" געפלאַנצט געוואָרן מיט צוויי זוימען פּער ליניע. ווייטערדיקע באַטשעס זענען געפלאַנצט געוואָרן אַזוי שנעל ווי דער פריערדיקער באַטש איז פאַראַרבעט געוואָרן ביז די גאַנצע פּאָפּולאַציע איז געווען אָפּגעשאַצט. צוויי עקספּערימענטאַלע לויפונגען זענען דורכגעפירט געוואָרן פֿאַר ביידע MAMPs מיט גענאָטיפּעס ווידער-ראַנדאָמיזירט אין יעדן פון די צוויי לויפונגען.
ROS פּרובירן זענען דורכגעפירט געוואָרן ווי פריער באַשריבן. בקיצור, פֿאַר יעדער ליניע, זעקס זוימען זענען געפֿלאַנצט געוואָרן אין 3 פֿאַרשידענע טאָפּן. פֿון די רעזולטאַטן זוימען, דריי זענען אויסגעקליבן געוואָרן באַזירט אויף איינהייטלעכקייט. זוימען וואָס האָבן אויסגעזען ומגעוויינטלעך אָדער זענען געווען באַדייטנד העכער אָדער קירצער ווי די מערהייט זענען נישט געניצט געוואָרן. פֿיר בלאַט דיסקס פֿון 3 מם דיאַמעטער זענען אַרויסגעשניטן געוואָרן פֿון דעם ברייטסטן טייל פֿון דעם 4טן בלאַט פֿון דריי פֿאַרשידענע 15-טאָגיקע סאָרגאַם פלאַנצן. איין דיסק פּער בלאַט פֿון צוויי פלאַנצן און צוויי דיסקס פֿון איין פלאַנצ, מיטן צווייטן דיסק וואָס איז געוואָרן דער וואַסער קאָנטראָל (זען אונטן). די דיסקס זענען אינדיווידועל געלייגט אויף 50 µl H20 אין אַ שוואַרצער 96-ברונעם טעלער, פֿאַרזיגלט מיט אַן אַלומינום פֿאַרזיגלונג צו פֿאַרמייַדן אויסשטעלונג צו ליכט, און געהאַלטן ביי צימער טעמפּעראַטור איבער נאַכט. דעם נעקסטן מאָרגן איז אַ רעאַקציע לייזונג געמאַכט געוואָרן מיט 2 מג/מל כעמילומינעסענט פּראָבע L-012 (וואַקאָ, קאַטאַלאָג # 120-04891), 2 מג/מל כריין פּעראָקסידאַז (טיפּ VI-A, סיגמאַ-אַלדריטש, קאַטאַלאָג # P6782), און 100 מג/מל כיטין אָדער 2 μM פון Flg22. 50 µl פון דער רעאַקציע לייזונג איז צוגעגעבן געוואָרן צו דריי פון די פיר וועללעך. דער פערטער וועלל איז געווען אַ מאָק קאָנטראָל, צו וועלכער די רעאַקציע לייזונג אָן די MAMP איז צוגעגעבן געוואָרן. פיר ליידיקע וועללעך מיט בלויז וואַסער זענען אויך אַרייַנגערעכנט געוואָרן אין יעדער פּלאַטע.
נאכדעם וואס מען האט צוגעלייגט די רעאקציע לייזונג, איז די לומינעסענס געמאסטן געווארן ניצנדיג א SynergyTM 2 מולטי-דעטעקציע מיקראפלאטע לייענער (BioTek) יעדע 2 מינוט פאר 1 שעה. דער פלאטע לייענער נעמט לומינעסענס מעסטונגען יעדע 2 מינוט בעת דעם 1 שעה. די סומע פון אלע 31 לייענונגען איז אויסגערעכנט געווארן צו געבן דעם ווערט פאר יעדן ברונעם. דער געשאצטער ווערט פאר דער MAMP רעאקציע פאר יעדן גענאטיפ איז אויסגערעכנט געווארן אלס (דורכשניטלעכער לומינעסענס ווערט פון די דריי עקספערימענטאלע ברונעם - דער מאק ברונעם ווערט) -מינוס דער דורכשניטלעכער ליידיגער ברונעם ווערט. די ליידיגע ברונעם ווערטן זענען קאנסיסטאנט געווען נאנט צו נול.
בלעטער דיסקס פוןניקאָטיאַנאַ בענטאַמיאַנאַ, איין הויך-רעספּאָנסיוו סאָרגאַם ליניע (SC0003), און איין נידעריק-רעספּאָנסיוו סאָרגאַם ליניע (PI 6069) זענען אויך אַרייַנגערעכנט געוואָרן ווי קאָנטראָלן אין יעדער 96-ברונעם פּלאַטע פֿאַר קוואַליטעט קאָנטראָל צוועקן.
ב. קוקיצוגרייטונג פון אינאקולום און אינאקולאציע
ב. קוקיאינאקולום איז צוגעגרייט געוואָרן ווי פריער באַשריבן. בקיצור, סאָרגהום קערלעך זענען געוואָרן איינגעווייקט אין וואַסער פֿאַר דריי טעג, אָפּגעשווענקט, אַרײַנגעשעפּט אין 1 ליטער קאָנישע פֿלעשלעך און אויטאָקלאַוועט פֿאַר אַ שעה ביי 15 פּסי און 121 °C. די קערלעך זענען דערנאָך אינאקולירט געוואָרן מיט אַרום 5 מל מאַסערירטע מיסעליע פֿון אַ פֿרישער קולטור פֿוןב. קוקיLSLP18 איזאָלירט און געלאָזט פֿאַר 2 וואָכן ביי צימער טעמפּעראַטור, שאָקלנדיק די פלאַשן יעדע 3 טעג. נאָך 2 וואָכן, זענען די מיט פונגוס באַפֿאַלענע סאָרגאַם קערלעך לופֿט-געטריקנט און דערנאָך אויפֿגעהיט ביי 4 °C ביז פֿעלד-אינאָקולאַציע. דער זעלביקער אינאָקולום איז געניצט געוואָרן פֿאַר דער גאַנצער פּראָבע און געמאַכט פֿריש יעדעס יאָר. פֿאַר אינאָקולאַציע, זענען 6-10 באַפֿאַלענע קערלעך געלייגט געוואָרן אין דעם קרוין פֿון 4-5 וואָכן אַלטע סאָרגאַם פלאַנצן. די ספּאָרן פּראָדוצירט פֿון די פונגוס האָבן אָנגעהויבן אינפֿעקציע אין די יונגע סאָרגאַם פלאַנצן אין אַ וואָך.
זוימען צוגרייטונג
פארן פלאנצן אין פעלד איז סאָרגאַם זוימען באהאנדלט געווארן מיט א פונגיציד, אינסעקטיציד, און זיכערהייטס-געמיש וואס האט אנטהאלטן ~ 1% ספּיראַטאָ 480 FS פונגיציד, 4% סעברינג 480 FS פונגיציד, 3% סאָרפּראָ 940 ES זוימען זיכערהייטס-געמיש. דערנאך זענען די זוימען לופט-געטריקנט געווארן פאר 3 טעג, וואס האט צוגעשטעלט א דינע שיכט פון דעם געמיש ארום די זוימען. דער זיכערהייטס-געמיש האט ערלויבט די נוצן פון דעם הערביציד דועל מאַגנום אלס א פאַר-אויפֿקום באַהאַנדלונג.
אפשאצונג פון ציל בלאַט פלעק קעגנשטעל
די SCP איז געפלאנצט געווארן ביי דער צענטראלער קראפס ריסערטש סטאנציע אין קלייטאן, נארט קאראליינע, דעם 14טן-15טן יוני 2017 און דעם 20סטן יוני, 2018 אין א ראנדאמיזירטן גאנצן בלאק דיזיין מיט צוויי עקספערימענטאלע רעפליקאציעס אין יעדן פאל. עקספערימענטן זענען געפלאנצט געווארן אין 1.8 מעטער איינציקע רייען מיט א 0.9 מעטער ריי ברייט ניצנדיק 10 זוימען פער פלעקל. צוויי גרענעץ רייען זענען געפלאנצט געווארן ארום דעם פּעריפעריע פון יעדן עקספערימענט צו פארמיידן ברעג עפעקטן. די עקספערימענטן זענען אינאקולירט געווארן דעם 20סטן יולי, 2017 און דעם 20סטן יולי, 2018, אין וועלכן פונקט די סאָרגהום פלאנצן זענען געווען אין וואוקס סטאדיום 3. רייטינגס זענען גענומען געווארן אויף א סקאַלע פון איין ביז ניין, וואו פלאנצן וואס ווייזן קיין סימנים פון קראנקהייט זענען געשאצט געווארן אלס א ניין און אינגאנצן טויטע פלאנצן זענען געשאצט געווארן אלס איינס. צוויי רייטינגס זענען גענומען געווארן אין 2017 און פיר לייענונגען אין 2018 אנגעהויבן צוויי וואכן נאך אינאקולאציע יעדעס יאר. sAUDPC (סטאנדארדיזירטע שטח אונטער קראנקהייט פראגרעסיע קורווע) איז אויסגערעכנט געווארן ווי פריער באשריבן.
פּאָסט צייט: 1טן אַפּריל 2021